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同立海源AMMS®高純度NK試劑盒套裝2.0(AMMS®High Purity NK Cell Culture Kit 2.0)
產品貨號:AS-26
同立海源AMMS®高純度NK試劑盒套裝2.0
產品描述
本產品適用于新鮮外周血經高純度NK添加因子分離獲得的PBMC,經體外活化擴增獲得CD3-CD56+比例>95%的NK細胞。僅限體外研究使用。
高純度NK試劑盒套裝2.0 產品特點
1、操作簡單:在分血過程中20分鐘完成CD3-的PBMC的富集;
2、外周血NK純度達95%以上。
高純度NK試劑盒套裝2.0 套裝組成

注意事項
1.血樣要求:
①外周血 PBMC需2.5×107cells(推薦采血量50mL左右,用肝su鈉真空采xue管),建議采血后 4 小時內操作,建議做淋巴細胞亞群分析。不建議使用凍存的外周血。
2.種瓶密度:PBMC 鋪瓶的起始細胞密度建議1×106個/mL,樣本狀態差可適當提高鋪瓶密度至2×106 個/mL。
3.補液密度:補液前密度一般在 1.5~2×106 個/mL;補液后密度一般在0.6~1×106 個/mL ,不可低于 0.6×106 個 /mL。
4.培養基的使用:
① 每次補液前需要將培養基在室溫下自然復溫。
② 禁止將整瓶培養基放入 37℃孵箱復溫,否則會加速補液培養基中細胞因子的失活。
③ 配置好的擴增培養基(含 IL-2)時效較短,建議一周左右使用完,尤其是活化前期(前 7 天)。
5.正確處理和保存血漿:具體見說明書。離心后的血漿要確保澄清。
6 .培養袋的使用:培養體積小于 1L 的時候,需要折疊培養袋再進行放置。建議使用我司推薦型號。
7 .靈活掌握補液時機:細胞擴增狀態不理想時,可推遲補液時間,但是盡量不要調整補液的體積尤其注意第一 次補液的時機。 裝袋后的補液體積可根據培養時間的情況進行調整。
8 .控制細胞結團:細胞裝袋前,需要根據克隆團的情況充分拍散細胞。裝袋后也需每天對袋子進行拍打,揉搓 肉眼觀察較大的細胞團。
9 .包被時間:A 因子包被后需 4℃平放過夜。(緊急情況下可嘗試 37℃包被2小時)
10. 培養初期不要隨意晃動培養瓶:否則活化的克隆團容易飄起來,而降低包被因子對細胞團的活化。
11.因子的使用:為減少因子掛壁的損失,建議使用前進行離心處理,將含因子的西林瓶放入50mL離心管中,1000rpm離心1-2min。
12.設備保養:定期檢查 CO2 培養箱溫度、濃度并及時更換濾網。定期保養和清潔生物安全柜。
13.環境監測:定期更換初效、中效、高效過濾器,保證潔凈區環境標準。
14 .固定實驗耗材種類和型號:需提前評估變更型號、規格對培養效果的影響,如175cm2的培養瓶,細胞培養袋等。
15.PBMC 的收集:因分血過程中白膜層僅收集了CD3-的淋巴細胞,收獲的PBMC細胞量會比未添加高純度NK因子的細胞數少1/3-1/2。